绵羊血清(无菌过滤)200ml详细介绍：产品规格：100ml/200ml/500ml/500ml*20使用范围：仅供科研使用保存温度：-20℃绵羊血清是经无菌采集、批量混合，＊终过3次0．1um过滤分装而成。促细胞生长的三大指标超过国家标准。绵羊血清适合于单抗研制、较常规的原代和传代细胞培养、规模化培养的疫苗生产。 正常血清是用来描述来自没有用特异抗原进行免疫产生抗体的动物血清。因此正常血清与抗血清相对。正常血清包含血清蛋白的一般补体，包括存在于特定物种健康动物体内的不同种类的免疫球蛋白。提供的正常血清产品经过脂类抽提以提高透明度，经去盐和透析处理以去除包含叠氮化钠的磷酸缓冲液，并＊后冻干以获得冻干粉末。正常血清非常适用于作为封闭试剂去除非特异性杂交。正常血清在检测一般或特异抗体纯化方法的时候也经常作为对照使用。绵羊血清(无菌过滤)的功能: 提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。起酸碱度缓冲液作用。提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。欢迎广大客户电话订购标准绵羊血清(无菌过滤、热灭活)！动物血清样本及反应试剂 在现在的ELISA商品试剂盒中，血清样本的加入几乎是*的要使用微量加样器加入样本的步骤。使用微量加样器加样必须注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加，除了要注意滴加的角度外，滴加的速度也很重要，滴加太快，很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象，这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附，从而引起非特异显色。所以，有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂的错误所致。绵羊血清(无菌过滤)主要成分以及鉴别方式： 血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。 血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反应被激活，血液迅速凝固，形成胶冻。凝血块收缩，其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清，也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中，纤维蛋白原转变成纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆的区别。而在凝血反应中，血小板释放出许多物质，各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化，如凝血酶原变成凝血酶，并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰，血液中许多化学成分的分析，都以血清为样品。绵羊血清可用于普通细胞培养和配置试剂，也适用于正常封闭。 在绵羊肺炎支原体EF-Tu和HSP70蛋白免疫原性分析及补体ELISA方法的建立实验中选取绵羊肺炎支原体细菌延伸因子Tu(elongation factor Tu,EF-Tu)蛋白和热休克70蛋白(heat shock protein 70,HSP70),对其进行免疫原性分析,并建立了绵羊肺炎支原体血清抗体ELISA检测方法,以期为绵羊肺炎支原体病的防治提供一些研究基础。本文首先对绵羊肺炎支原体临床分离株Mo-1的elongation factor Tu,EF-Tu)EF-Tu和HSP70蛋白进行了表达和纯化。然后,通过免疫印迹试验证明EF-Tu和HSP70两种蛋白均存在于由绵羊肺炎支原体膜蛋白的TritonX-114提取物中。将原核表达的重组蛋白rEF-Tu(recombinant EF-Tu)和rHSP70(recombinant HSP70)分别免疫BALB/c小鼠,进行免疫原性分析。 结果表明,与绵羊肺炎支原体全细胞提取物(Mo extracts)免疫对照组比较,上述两种重组蛋白均能刺激小鼠产生较高的IgG水平,且IgG1和IgG2a水平显著高于Mo extracts对照组。rEF-Tu和rHSP70免疫组小鼠血清中Thl型(IFN-γ、TNF-α、IL-12p70)和Th2型(IL-4、IL-5、IL-6)细胞因子水平显著高于Mo extracts对照组。ELISPOT试验进一步证实,rHSP70比rEF-Tu和Mo extracts能诱导更多的特异性分泌IFN-γ的淋巴细胞。由此说明,rEF-Tu和rHSP70蛋白可使小鼠同时产生较强体液免疫应答及细胞免疫应答。另外,体外生长抑制试验表明,抗rHSP70、抗rEF-Tu和抗Moextracts小鼠血清均可有效抑制固体培养基上绵羊肺炎支原体的生长,其中rHSP70组抑菌效果优于rEF-Tu组和Mo extracts组。本文利用菊糖提纯豚鼠血清中的补体C3b成分,免疫小鼠后筛选得到可用于建立补体结合酶联免疫吸附试验方法(complement fixation ELISA,CF-ELISA)的抗豚鼠补体C3b单克隆抗体。经鉴定,所获得的单克隆抗体具有高的亲和力及特异性,可特异识别豚鼠补体C3bα’链。在此基础上,选择免疫原性较优且具有高度保守性的rHSP70作为包被抗原,建立了Mo-rHSP70-CF-ELISA和Mo-rHSP70-iELISA方法,两者均具有良好的敏感性和特异性。
山羊血清（无菌过滤）500ml以下是关于山羊血清（无菌过滤）的详细介绍：基本信息来源：采集自正常健康的山羊供体。外观：通常为淡黄色澄清液体，无噬菌体，无溶血，无异物，无细菌、真菌、支原体等微生物污染。成分：包含多种蛋白质、氨基酸、维生素、矿物质、激素、生长因子等营养物质，还含有补体等生物活性物质。制作工艺：采用健康山羊的血液为原料，经无菌采集、分离、粗滤、澄清、混合，再通过 0.1μm 或 0.22μm 孔径的滤膜进行微孔过滤等步骤制成。作用与用途细胞培养：为细胞提供氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等基本营养物质，维持细胞的生长、增殖和正常生理功能；含有激素和各种生长因子，能促进细胞的分裂和发育；提供促接触和伸展因子，使细胞贴壁，免受机械损伤；对培养中的细胞起到某些保护作用，如中和毒性物质、提供蛋白酶抑制剂等。免疫学研究：常用于各种免疫实验，如免疫荧光、免疫组化等，起到封闭或对照的作用，以减少非特异性结合，提高实验的准确性和特异性。病毒研究：可用于病毒的培养和研究，为病毒的生长和繁殖提供适宜的环境。诊断试剂生产：作为原料用于生产各种诊断试剂，如用于检测病原体抗体或抗原的试剂等。保存与使用保存条件：一般保存在 - 15℃至 - 20℃的低温环境中。若一次无法用完一瓶，建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。解冻方法：采用缓慢解冻法，把在 - 15℃至 - 20℃低温冰箱中保存的血清放入 4℃冰箱中解冻约 1 天，待全部解冻后再分装。溶解过程中需规则地摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。使用注意事项：避免反复冻融，否则可能产生沉淀，若有沉淀产生，可以通过无菌条件下，3500rpm 离心 10min 除去沉淀；未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温；血清在室温或 4℃冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。质量控制微生物检测：通过无菌检测、支原体检测等方法，确保血清中无细菌、真菌、支原体等微生物污染。内毒素检测：检测血清中的内毒素含量，要求内毒素含量较低，以避免内毒素对细胞产生毒性作用。蛋白含量及成分分析：检测血清中各种蛋白质的含量和成分，保证血清中营养成分的比例和含量符合相关应用的要求，并且批次间保持稳定。
小鼠（Mouse）睾酮（T）ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被睾酮（T）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成＊终的黄色。颜色的深浅和样品中的睾酮（T）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，＊终结果乘以5才是样本实际浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、1.5、3、6、12、24 ng/mL试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。 试剂盒性能1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2. 灵敏度：＊低检测浓度小于0.1 ng/mL。3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。6. 有效期：6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。 FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES. Mouse Testoterone (T) ELISA Kit instruction Intended useThis T ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at 450 nm using a spectrophotometer. In order to measure the concentration of T in the sample, this T ELISA Kit includes a set of calibration standards. The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus T concentration. The concentration of T in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.Sample collection and storagesSerum - Use a serum separator tube and allow samples to clot for 30 minutes before centrifugation for 10 minutes at approximately 3000×g. Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃ or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cyclesPlasma - Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant. Centrifuge samples for 30 minutes at 3000×g at 2-8℃ within 30 minutes of collection. Store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Cell culture supernates and other biological fluids - Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Note: The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.Materials required but not supplied1. Standard microplate reader(450nm)2. Precision pipettes and Disposable pipette tips.3. 37 ℃ incubatorPrecautions1. Do not substitute reagents from one kit to another. Standard, conjugate and microplates are matched for optimal performance. Use only the reagents supplied by manufacturer.2. Do not remove microplate from the storage bag until needed. Unused strips should be stored at 2-8°C in their pouch with the desiccant provided.3. Mix all reagents before using.Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature ( 20-25°C)Materials suppliedName96 determinations48 determinationsMicroelisa stripplate12*8strips12*4stripsStandard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSample Diluent6.0ml3.0mlHRP-Conjugate reagent10.0ml5.0ml20X Wash solution25ml15mlChromogen Solution A6.0ml3.0mlChromogen Solution B6.0ml3.0mlStop Solution6.0ml3.0mlClosure plate membrane22User manual11Sealed bags11Note: Standard (S0 → S5) concentration was followed by:0,1.5,3,6,12,24 ng/mLReagent preparation20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water 1:20.Assay procedure1. Prepare all reagents before starting assay procedure. It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.2. Add standard: Set Standard wells, testing sample wells. Add standard 50μl to standard well.3. Add Sample: Add testing sample 10μl then add Sample Diluent 40μl to testing sample well; Blank well doesn’t add anyting.4. Add 100μl of HRP-conjugate reagent to each well, cover with an adhesive strip and incubate for 60 minutes at 37°C. 5. Aspirate each well and wash, repeating the process four times for a total of five washes. Wash by filling each well with Wash Solution (400μl) using a squirt bottle, manifold dispenser or autowasher. Complete removal of liquid at each step is essential to good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting. Invert the plate and blot it against clean paper towels.6. Add chromogen solution A 50μl and chromogen solution B 50μl to each well. Gently mix and incubate for 15 minutes at 37°C. Protect from light.7. Add 50μl Stop Solution to each well. The color in the wells should change from blue to yellow. If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform, gently tap the plate to ensure thorough mixing.8. Read the Optical Density (O.D.) at 450 nm using a microtiter plate reader within 15 minutes.Calculation of results1. This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample. The standard curve is generated by plotting the average O.D. (450 nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical (Y) axis versus the corresponding concentration on the horizontal (X) axis. 2. First, calculate the mean O.D. value for each standard and sample. All O.D. values, are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation. Construct the standard curve using graph paper or statistical software. 3. To determine the amount in each sample, first locate the O.D. value on the Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve. At the point of intersection, draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration. 4. Any variation in operator, pipetting and washing technique, incubation time or temperature, and kit age can cause variation in result. Each user should obtain their own standard curve.5. The sensitivity by this assay is 0.1ng/mL6. Standard curve Storage： 2-8℃.validity： six months. FOR RESEARCH USE ONLY; NOT FOR THERAPEUTIC OR DIAGNOSTIC APPLICATIONS! PLEASE READ THROUGH ENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!
小鼠（Mouse）抑制素B（INH-B）ELISA检测试剂盒本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被抑制素B（INH-B）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成＊终的黄色。颜色的深浅和样品中的抑制素B（INH-B）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪（450nm）2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，＊终结果乘以5才是样本实际浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、3、6、12、24、48 pg/mL试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。 试剂盒性能1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2. 灵敏度：＊低检测浓度小于1.0 pg/mL。3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。6. 有效期：6个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。 FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES. Mouse inhibin B (INH-B) ELISA Kit instruction Intended useThis INH-B ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at 450 nm using a spectrophotometer. In order to measure the concentration of INH-B in the sample, this INH-B ELISA Kit includes a set of calibration standards. The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus INH-B concentration. The concentration of INH-B in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.Sample collection and storagesSerum - Use a serum separator tube and allow samples to clot for 30 minutes before centrifugation for 10 minutes at approximately 3000×g. Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃ or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cyclesPlasma - Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant. Centrifuge samples for 30 minutes at 3000×g at 2-8℃ within 30 minutes of collection. Store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Cell culture supernates and other biological fluids - Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Note: The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.Materials required but not supplied1. Standard microplate reader(450nm)2. Precision pipettes and Disposable pipette tips.3. 37 ℃ incubatorPrecautions1. Do not substitute reagents from one kit to another. Standard, conjugate and microplates are matched for optimal performance. Use only the reagents supplied by manufacturer.2. Do not remove microplate from the storage bag until needed. Unused strips should be stored at 2-8°C in their pouch with the desiccant provided.3. Mix all reagents before using.Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature ( 20-25°C)Materials suppliedName96 determinations48 determinationsMicroelisa stripplate12*8strips12*4stripsStandard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSample Diluent6.0ml3.0mlHRP-Conjugate reagent10.0ml5.0ml20X Wash solution25ml15mlChromogen Solution A6.0ml3.0mlChromogen Solution B6.0ml3.0mlStop Solution6.0ml3.0mlClosure plate membrane22User manual11Sealed bags11Note: Standard (S0 → S5) concentration was followed by:0,3,6,12,24,48 pg/mlReagent preparation20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water 1:20.Assay procedure1. Prepare all reagents before starting assay procedure. It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.2. Add standard: Set Standard wells, testing sample wells. Add standard 50μl to standard well.3. Add Sample: Add testing sample 10μl then add Sample Diluent 40μl to testing sample well; Blank well doesn’t add anyting.4. Add 100μl of HRP-conjugate reagent to each well, cover with an adhesive strip and incubate for 60 minutes at 37°C. 5. Aspirate each well and wash, repeating the process four times for a total of five washes. Wash by filling each well with Wash Solution (400μl) using a squirt bottle, manifold dispenser or autowasher. Complete removal of liquid at each step is essential to good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting. Invert the plate and blot it against clean paper towels.6. Add chromogen solution A 50μl and chromogen solution B 50μl to each well. Gently mix and incubate for 15 minutes at 37°C. Protect from light.7. Add 50μl Stop Solution to each well. The color in the wells should change from blue to yellow. If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform, gently tap the plate to ensure thorough mixing.8. Read the Optical Density (O.D.) at 450 nm using a microtiter plate reader within 15 minutes.Calculation of results1. This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample. The standard curve is generated by plotting the average O.D. (450 nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical (Y) axis versus the corresponding concentration on the horizontal (X) axis. 2. First, calculate the mean O.D. value for each standard and sample. All O.D. values, are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation. Construct the standard curve using graph paper or statistical software. 3. To determine the amount in each sample, first locate the O.D. value on the Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve. At the point of intersection, draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration. 4. Any variation in operator, pipetting and washing technique, incubation time or temperature, and kit age can cause variation in result. Each user should obtain their own standard curve.5. The sensitivity by this assay is 1.0 pg/ml6. Standard curve Storage： 2-8℃.validity： six months. FOR RESEARCH USE ONLY; NOT FOR THERAPEUTIC OR DIAGNOSTIC APPLICATIONS! PLEASE READ THROUGH ENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!
肉毒碱棕榈酰转移酶（CPT-1）试剂盒分光光度法 50 管/48 样 货号：DM-C-CPT1 正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 测定意义： 肉毒碱棕榈酰转移酶是存在于线粒体内膜的一类酰基转移酶。可逆地催化从酰基辅酶 A 将酰 基转移至 L-肉毒碱的反应，在转运脂肪酸通过线粒体内膜的过程中起重要作用。 测定原理： 基于肉碱和脂酰辅酶 A 在丙二酰辅酶 A 存在与否的条件下，通过肉碱脂酰转移酶(CPT-I)的 作用，产生脂酰肉碱，并释放出巯基辅酶 A(COA-SH)，与 Ellman 试剂 DN-TB 反应后，产 生黄色的 TNB。通过其吸收峰值得变化（412nm），来定量分析 CPT-1 的活性。 需自备的仪器和用品： 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、无 水乙醇和蒸馏水 试剂组成和配制： 试剂一：液体 50mL×1 瓶，-20℃保存； 试剂二：液体 10mL×1 瓶，-20℃保存； 试剂三：液体 1mL×1 支，-20℃保存； 试剂四：液体 55mL×1 瓶，4℃保存； 试剂五：粉剂×1 瓶，4℃保存； 试剂六：粉剂×1 支，-20℃保存； 样本的前处理： 组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离： ① 称取约 0.1g 组织或收集 500 万细胞，加入 1mL 试剂一和 10uL 试剂三，用冰浴匀浆器 或研钵匀浆。 ② 将匀浆液于 600g，4℃离心 5min。 ③ 弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心 10min。 ④ 上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的 CPT-1（此步可选做）。 ⑤ 在步骤④的沉淀中加入 200uL 试剂二和 2uL 试剂三，超声波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3 秒，间隔 10 秒，重复 30 次），用于线粒体 CPT-1 测定。 测定步骤： 1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 412nm，蒸馏水调零。 2、样本测定 （1） 在试剂五中加入 2mL 无水乙醇，混匀，再加入 44mL 试剂四，混匀，37℃（哺乳动物） 或 25℃（其它物种）孵育 5min；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融； （2） 在试剂六中加入 2mL 蒸馏水，混匀，37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）孵育 5min； 用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融； 东升国际-创意平台-注册畅享文化之梦! jbvoptical.com（3） 在 1mL 玻璃比色皿中加入 40μL 样本、880μL 试剂五和 40μL 试剂六，混匀，记录 412nm 处 20 秒时的初始吸光度 A1 和 2 分 20 秒时的吸光度 A2，计算 ΔA=A2-A1。 CPT-1 活性计算： （1） 按样本蛋白浓度计算： 单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。 CPT-1（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×10 9]÷(V 样×Cpr) ÷T=880×ΔA÷Cpr 此法需要自行测定样本蛋白质浓度。 （2） 按样本鲜重计算： 单位的定义：每 g 组织每分钟催化产生 1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。 CPT-1（nmol/min/g 鲜重）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×10 9]÷（W× V 样÷V 样总）÷T=177.8×ΔA÷W （3） 按细菌或细胞密度计算： 单位的定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟催化产生 1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。 CPT-1（nmol/min/10 4 cell）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×10 9]÷（500×V 样÷V 样总）÷T=0.3556×ΔA V 反总：反应体系总体积，9.6×10 -4 L；ε：TNB 摩尔消光系数，1.36×10 4 L / mol /cm；d：比 色皿光径，1cm；V 样：加入样本体积，0.04 mL；V 样总：加入提取液体积，0.202 mL；T： 反应时间，2 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总 数，500 万。 东升国际-创意平台-注册畅享文化之梦! jbvoptical.com
肉毒碱棕榈酰转移酶（CPT-1）试剂盒微量法 规格：100 管/96 样正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：肉毒碱棕榈酰转移酶是存在于线粒体内膜的一类酰基转移酶。可逆地催化从酰基辅酶 A 将酰基转移至 L-肉毒碱的反应，在转运脂肪酸通过线粒体内膜的过程中起重要作用。测定原理：基于肉碱和脂酰辅酶 A 在丙二酰辅酶 A 存在与否的条件下，通过肉碱脂酰转移酶(CPT-I)的作用，产生脂酰肉碱，并释放出巯基辅酶 A(COA-SH)，与 Ellman 试剂 DN-TB 反应后，产生黄色的 TNB。通过其吸收峰值得变化（412nm），来定量分析 CPT-1 的活性。需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水试剂组成和配制：试剂一：液体 100mL×1 瓶，-20℃保存； 试剂二：液体 20mL×1 瓶，-20℃保存； 试剂三：液体 1.5mL×1 支，-20℃保存； 试剂四：液体 30mL×1 瓶，4℃保存； 试剂五：粉剂×1 瓶，4℃保存；试剂六：粉剂×1 支，-20℃保存；样本的前处理：组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：① 称取约 0.1g 组织或收集 500 万细胞，加入 1mL 试剂一和 10uL 试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。② 将匀浆液于 600g，4℃离心 5min。③ 弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心 10min。④ 上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的 CPT-1（此步可选做）。⑤ 在步骤④的沉淀中加入 200uL 试剂二和 2uL 试剂三，超声波破碎（冰浴，功率 20％或200W，超声 3 秒，间隔 10 秒，重复 30 次），用于线粒体 CPT-1 测定。测定步骤：1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 412nm，蒸馏水调零。2、样本测定 （1） 在试剂五中加入 1mL 无水乙醇，混匀，再加入 22mL 试剂四，混匀，37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）孵育 5min；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；（2） 在试剂六中加入 1mL 蒸馏水，混匀，37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）孵育 5min；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；（3） 在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本、220μL 试剂五和 10μL 试剂六，混匀，记录 412nm 处 20 秒时的初始吸光度 A1 和 2 分 20 秒时的吸光度 A2，计算 ΔA=A2-A1。CPT-1 活性计算：a. 使用微量石英比色皿测定的计算公式如下：（1） 按样本蛋白浓度计算：单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。CPT-1（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=880×ΔA÷Cpr 此法需要自行测定样本蛋白质浓度。（2） 按样本鲜重计算：单位的定义：每 g 组织每分钟催化产生 1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。CPT-1（nmol/min/g 鲜重）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷（W× V 样÷V 样总）÷T=177.8×ΔA÷W（3） 按细菌或细胞密度计算：单位的定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟催化产生 1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。CPT-1（nmol/min/104 cell）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷（500×V 样÷V 样总）÷T=0.3556×ΔA V 反总：反应体系总体积，2.4×10-4 L；ε：TNB 摩尔消光系数，1.36×104 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V 样：加入样本体积，0.01 mL；V 样总：加入提取液体积，0.202 mL；T： 反应时间，2 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500 万。b. 使用 96 孔板测定的计算公式如下：（1） 按样本蛋白浓度计算：单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。CPT-1（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=1760×ΔA÷Cpr 此法需要自行测定样本蛋白质浓度。（2） 按样本鲜重计算：单位的定义：每 g 组织每分钟催化产生 1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。CPT-1（nmol/min/g 鲜重）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷（W ×V 样÷V 样总）÷T=355.6×ΔA÷W（3） 按细菌或细胞密度计算：单位的定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟催化产生 1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。CPT-1（nmol/min/104 cell）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷（500×V 样÷V 样总）÷T=0.711×ΔA V 反总：反应体系总体积，2.4×10-4 L；ε：TNB 摩尔消光系数，1.36×104 L / mol /cm；d：96 孔板光径，0.5cm；V 样：加入样本体积，0.01 mL；V 样总：加入提取液体积，0.202 mL； T：反应时间，2 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500 万。
山羊血清（无菌过滤）200ml以下是关于山羊血清（无菌过滤）的详细介绍：基本信息来源：采集自正常健康的山羊供体。外观：通常为淡黄色澄清液体，无噬菌体，无溶血，无异物，无细菌、真菌、支原体等微生物污染。成分：包含多种蛋白质、氨基酸、维生素、矿物质、激素、生长因子等营养物质，还含有补体等生物活性物质。制作工艺：采用健康山羊的血液为原料，经无菌采集、分离、粗滤、澄清、混合，再通过 0.1μm 或 0.22μm 孔径的滤膜进行微孔过滤等步骤制成。作用与用途细胞培养：为细胞提供氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等基本营养物质，维持细胞的生长、增殖和正常生理功能；含有激素和各种生长因子，能促进细胞的分裂和发育；提供促接触和伸展因子，使细胞贴壁，免受机械损伤；对培养中的细胞起到某些保护作用，如中和毒性物质、提供蛋白酶抑制剂等。免疫学研究：常用于各种免疫实验，如免疫荧光、免疫组化等，起到封闭或对照的作用，以减少非特异性结合，提高实验的准确性和特异性。病毒研究：可用于病毒的培养和研究，为病毒的生长和繁殖提供适宜的环境。诊断试剂生产：作为原料用于生产各种诊断试剂，如用于检测病原体抗体或抗原的试剂等。保存与使用保存条件：一般保存在 - 15℃至 - 20℃的低温环境中。若一次无法用完一瓶，建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。解冻方法：采用缓慢解冻法，把在 - 15℃至 - 20℃低温冰箱中保存的血清放入 4℃冰箱中解冻约 1 天，待全部解冻后再分装。溶解过程中需规则地摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。使用注意事项：避免反复冻融，否则可能产生沉淀，若有沉淀产生，可以通过无菌条件下，3500rpm 离心 10min 除去沉淀；未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温；血清在室温或 4℃冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。质量控制微生物检测：通过无菌检测、支原体检测等方法，确保血清中无细菌、真菌、支原体等微生物污染。内毒素检测：检测血清中的内毒素含量，要求内毒素含量较低，以避免内毒素对细胞产生毒性作用。蛋白含量及成分分析：检测血清中各种蛋白质的含量和成分，保证血清中营养成分的比例和含量符合相关应用的要求，并且批次间保持稳定。
山羊血清（无菌过滤）100ml以下是关于山羊血清（无菌过滤）的详细介绍：基本信息来源：采集自正常健康的山羊供体。外观：通常为淡黄色澄清液体，无噬菌体，无溶血，无异物，无细菌、真菌、支原体等微生物污染。成分：包含多种蛋白质、氨基酸、维生素、矿物质、激素、生长因子等营养物质，还含有补体等生物活性物质。制作工艺：采用健康山羊的血液为原料，经无菌采集、分离、粗滤、澄清、混合，再通过 0.1μm 或 0.22μm 孔径的滤膜进行微孔过滤等步骤制成。作用与用途细胞培养：为细胞提供氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等基本营养物质，维持细胞的生长、增殖和正常生理功能；含有激素和各种生长因子，能促进细胞的分裂和发育；提供促接触和伸展因子，使细胞贴壁，免受机械损伤；对培养中的细胞起到某些保护作用，如中和毒性物质、提供蛋白酶抑制剂等。免疫学研究：常用于各种免疫实验，如免疫荧光、免疫组化等，起到封闭或对照的作用，以减少非特异性结合，提高实验的准确性和特异性。病毒研究：可用于病毒的培养和研究，为病毒的生长和繁殖提供适宜的环境。诊断试剂生产：作为原料用于生产各种诊断试剂，如用于检测病原体抗体或抗原的试剂等。保存与使用保存条件：一般保存在 - 15℃至 - 20℃的低温环境中。若一次无法用完一瓶，建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。解冻方法：采用缓慢解冻法，把在 - 15℃至 - 20℃低温冰箱中保存的血清放入 4℃冰箱中解冻约 1 天，待全部解冻后再分装。溶解过程中需规则地摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。使用注意事项：避免反复冻融，否则可能产生沉淀，若有沉淀产生，可以通过无菌条件下，3500rpm 离心 10min 除去沉淀；未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温；血清在室温或 4℃冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。质量控制微生物检测：通过无菌检测、支原体检测等方法，确保血清中无细菌、真菌、支原体等微生物污染。内毒素检测：检测血清中的内毒素含量，要求内毒素含量较低，以避免内毒素对细胞产生毒性作用。蛋白含量及成分分析：检测血清中各种蛋白质的含量和成分，保证血清中营养成分的比例和含量符合相关应用的要求，并且批次间保持稳定。
标准新生牦牛血清（无菌过滤）500ML标准新生牦牛血清（无菌过滤）是一种常用于细胞培养等生物实验和研究的生物制品，以下是关于它的详细介绍：制备过程采血：从出生后未超过 20 天的健康新生牦牛体内采集血液，一般在符合卫生标准和动物福利的条件下，由专业人员操作，采用无菌采血技术，确保血液不受污染。分离血清：采集后的血液在无菌环境下自然凝固或经过离心等方式使血清与血细胞分离，得到粗制的新生牦牛血清。过滤除菌：将粗制血清通过一系列不同孔径的无菌滤膜进行过滤，通常会使用 0.2 微米孔径的滤膜，以去除细菌、真菌、支原体等微生物，获得无菌过滤的标准新生牦牛血清。作用与用途细胞培养：为细胞提供生长所需的营养物质，如氨基酸、维生素、矿物质、脂类、激素等，促进细胞的生长、增殖和贴壁，维持细胞的正常生理功能3。生物制药：在生物制药过程中，用于培养生产药物的细胞株，有助于提高药物产量和质量，也可作为生物制剂的添加成分，增强制剂的稳定性和活性。科研实验：在细胞生物学、分子生物学、免疫学等科研领域的实验中广泛应用，如用于细胞系的建立、细胞信号转导研究、抗体生产等实验项目。质量控制微生物检测：严格检测血清中是否含有细菌、真菌、支原体、病毒等微生物，确保无菌过滤的效果，防止微生物污染对细胞培养和实验结果产生影响。内毒素检测：内毒素含量是衡量血清质量的重要指标之一，内毒素过多会对细胞产生毒性作用，影响细胞的生长和功能，一般要求标准新生牦牛血清的内毒素含量控制在较低水平。蛋白含量及成分分析：检测血清中各种蛋白质的含量和成分，包括白蛋白、球蛋白、生长因子等，保证血清中营养成分的比例和含量符合细胞培养的要求，并且批次间的蛋白含量和成分稳定。储存与使用储存条件：一般需要在 - 20℃或更低的温度下冷冻保存，以保持血清的活性和稳定性，避免反复冻融，否则会导致血清中的蛋白变性和活性成分丧失。使用方法：在使用前，需要将冷冻的血清在 2-8℃的冰箱中缓慢解冻，解冻后的血清应尽快使用，避免长时间放置在室温下，防止微生物污染和活性成分降解，使用时根据实验要求，将血清添加到细胞培养液中，通常添加比例在 5%-20% 不等。
标准新生牦牛血清（无菌过滤）200ML标准新生牦牛血清（无菌过滤）是一种常用于细胞培养等生物实验和研究的生物制品，以下是关于它的详细介绍：制备过程采血：从出生后未超过 20 天的健康新生牦牛体内采集血液，一般在符合卫生标准和动物福利的条件下，由专业人员操作，采用无菌采血技术，确保血液不受污染。分离血清：采集后的血液在无菌环境下自然凝固或经过离心等方式使血清与血细胞分离，得到粗制的新生牦牛血清。过滤除菌：将粗制血清通过一系列不同孔径的无菌滤膜进行过滤，通常会使用 0.2 微米孔径的滤膜，以去除细菌、真菌、支原体等微生物，获得无菌过滤的标准新生牦牛血清。作用与用途细胞培养：为细胞提供生长所需的营养物质，如氨基酸、维生素、矿物质、脂类、激素等，促进细胞的生长、增殖和贴壁，维持细胞的正常生理功能3。生物制药：在生物制药过程中，用于培养生产药物的细胞株，有助于提高药物产量和质量，也可作为生物制剂的添加成分，增强制剂的稳定性和活性。科研实验：在细胞生物学、分子生物学、免疫学等科研领域的实验中广泛应用，如用于细胞系的建立、细胞信号转导研究、抗体生产等实验项目。质量控制微生物检测：严格检测血清中是否含有细菌、真菌、支原体、病毒等微生物，确保无菌过滤的效果，防止微生物污染对细胞培养和实验结果产生影响。内毒素检测：内毒素含量是衡量血清质量的重要指标之一，内毒素过多会对细胞产生毒性作用，影响细胞的生长和功能，一般要求标准新生牦牛血清的内毒素含量控制在较低水平。蛋白含量及成分分析：检测血清中各种蛋白质的含量和成分，包括白蛋白、球蛋白、生长因子等，保证血清中营养成分的比例和含量符合细胞培养的要求，并且批次间的蛋白含量和成分稳定。储存与使用储存条件：一般需要在 - 20℃或更低的温度下冷冻保存，以保持血清的活性和稳定性，避免反复冻融，否则会导致血清中的蛋白变性和活性成分丧失。使用方法：在使用前，需要将冷冻的血清在 2-8℃的冰箱中缓慢解冻，解冻后的血清应尽快使用，避免长时间放置在室温下，防止微生物污染和活性成分降解，使用时根据实验要求，将血清添加到细胞培养液中，通常添加比例在 5%-20% 不等。
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